葡萄球菌属检验方法及临床意义

发表时间:2018/4/4   来源:《心理医生》2018年8期   作者:邸宇峰
[导读] 葡萄球菌属细菌为一类革兰氏阳性球菌,因其常堆集排列呈葡萄串状而取名葡萄球菌属[1]。

(哈尔滨市结核病防治所结核病实验室  黑龙江哈尔滨  150018)
  【摘要】目的:探讨葡萄球菌属检验方法及临床意义。方法:选取2014年2月至2016年1月期间,我所检查的葡萄球菌属感染患者31例,对其检验方法及临床意义进行回顾性的分析。结果:经过实验室检验后,所有患者的样本中均存在葡萄球菌属,葡萄球菌属的实验室检验对病因的确定具有较高的指导意义。结论:同人类疾病相关的葡萄球菌属主要有表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及头状葡萄球菌,其会导致化脓性感染及病毒性休克等。
  【关键词】葡萄球菌属;检验方法;临床意义
  【中图分类号】R378.1                  【文献标识码】A                     【文章编号】1007-8231(2018)08-0088-02
  葡萄球菌属细菌为一类革兰氏阳性球菌,因其常堆集排列呈葡萄串状而取名葡萄球菌属[1]。葡萄球菌自然界与人体中广泛的存在,其大多数是非致病菌,少数于人与动物皮肤黏膜内存在的菌株会致使多种化脓性的感染,例如菌血症、痈、疖、脓肿等,其还可导致烫伤样的皮肤综合征与毒性的休克综合征等[2]。葡萄球菌为较为常见的化脓性球菌,同时也是医源性感染中较为常见的细菌。
  1.资料与方法
  1.1 一般资料
  选取2014年2月至2016年1月期间,我所检查的葡萄球菌属感染患者31例,其中男性患者16例,女性患者15例,患者年龄15至75岁,平均(43.9±15.1)岁。31例患者中皮肤软组织感染11例,内脏器官感染10例,全身感染8例,尿路感染2例。
  1.2 标本采集
  根据患者发生感染的疾病的不同,可采集其伤口分泌物、脓汁、渗出液、血液、痰液、粪便及脑脊液等[3]。因葡萄球菌广泛的分布在人体皮肤及黏膜上,因此在采集时需注意避免患者病灶周围的正常菌群的污染。
  2.检验
  2.1 标本的直接检查
  取患者的痰、渗出物、脓汁及脑脊液在进行离心后取其沉渣进行涂片,经过革兰染色后进行镜检,若在检查后发现革兰阳性菌,即可初步报告为疑为葡萄球菌[4]。


因在正常情况下,关节穿刺液、脑脊液等为无菌的,当检查时发现细菌则具有重要的价值,其他的体液标本中在检查时发现炎性细胞同样具有参考价值。
  2.2 分离培养与鉴定
  2.2.1分离培养  取患者静脉血约5 mL制血液标本,并注入50mL的葡萄糖肉汤进行增菌培养,若增菌液出现混浊,且内存在胶胨样的凝块,需进一步的转种至血琼脂平板上进行分离培养;分泌物、脓液及尿液标本可直接在血平板上进行培养,呕吐物、粪便标本可接种在高盐甘露醇的平板上,培养需将培养板置于35℃的培养箱中进行培养。在血平板上,金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色及柠檬色,周围存在明显β溶血环[5]。表皮的葡萄球菌落为无色素及白色,腐生的葡萄球菌落呈白色及柠檬色。取上述的可疑菌落经过镜检证实其为革兰阳性的球菌,则可进行进一步鉴定。尿道分泌物、脓汁及脑脊液的离心沉淀物可直接接种在血琼脂的培养基内,在35℃环境中培养1天后,可见不同色菌落。
  2.2.2鉴定  对于葡萄球菌鉴定常使用的试验有如下五种:第一,触酶试验,在进行触酶试验后,葡萄球菌为阳性,链球菌为阴性。第二,血浆凝固酶试验,血浆凝固酶为金黄色葡萄球菌产生的与其致病性相关的侵袭性酶,其分为结合型与游离型两种。其作用为使血浆中纤维蛋白于菌体的表面沉积与凝固,以此来达到阻碍细胞吞噬[6]。对于血浆凝固酶试验可以进行试管法与玻片法的检测。玻片法主要用于粗筛,如果玻片法结果呈可疑及阴性,则需使用试管法进行验证。第三,甘露醇的发酵试验,进行甘露醇的发酵试验后,金黄色葡萄球菌呈阳性。第四,新生霉素的敏感试验,对凝固酶呈阴性的葡萄球菌进行鉴别,可以使用新生霉素的敏感试验来鉴别,对新生霉素耐药的患者多是腐生葡萄球菌感染,敏感患者多为表皮的葡萄球菌感染。第五,肠毒素的检测,在食物中毒患者的标本中析出金黄色葡萄球菌还应进行肠毒素检测。
  3.结果
  经过实验室检验后,所有患者的样本中均存在葡萄球菌属,葡萄球菌属的实验室检验对病因的确定具有较高的指导意义。
  4.讨论
  发生葡萄球菌感染时的特点为感染部位会出现组织坏死、化脓及形成脓肿。对于金黄色葡萄球菌中凝固酶呈阳性的部分为人类最重要致病菌之一,其可以通过外源性及内源性的感染途径而引发社区及医院感染。可以产生多种的致病物质,其包括杀白细胞素、葡萄球菌溶血毒素、表皮剥脱毒素、耐热肠毒素、血浆凝固酶、毒素休克综合征毒素以及耐热的DNA酶等[7]。葡萄球菌引发人类的疾病主要包括如下三种:第一、侵袭性的疾病,主要是化脓性的炎症,细菌会通过多种的途径入侵机体,引发内脏器官与局部组织的感染,例如毛囊炎、疖、痈、伤口化脓性感染及蜂窝织炎等,其也可以引发全身性的感染,如脓毒血症、败血症、心内膜炎、骨髓炎及脑膜炎等。第二,毒素性的疾病,其可以通过不同毒素的产生而引发食物中毒、中毒性的休克综合征及烫伤样的皮肤综合征等。第三,菌群失调症为长期的应用广谱抗生素致使正常的菌群出现失调,而引发的假膜性的肠炎等[8]。对于葡萄球菌中凝固酶呈阴性的部分现已成为条件致病菌及免疫受损患者感染菌中的重要组成部分,同时也是医源性感染的主要菌种。其中表皮上的葡萄球菌会引发人工瓣膜性的心内膜炎、血管相关的感染、腹膜透析性的腹膜炎、静脉导管的感染及人工关节的感染等,而腐生葡萄球菌则为引发女性尿路感染重要因素之一。
  
  【参考文献】
  [1]蔡雪凤,曹宝森,刘艳琴,等.50株食源性金黄色葡萄球菌肠毒素特性及耐药分析[J].中国卫生检验杂志,2011, 21(2):419-421.
  [2]刘彩林,孙自镛.异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的流行性、实验室检测及临床意义[J].中华临床实验室管理电子杂志,2013,1(1):24-29.
  [3]张静,石祥奎.儿科葡萄球菌药敏检测中D-试验法的应用及临床意义[J].抗感染药学,2015(2):226-228.
  [4]李虹.金黄色葡萄球菌在各型过敏性紫癜患者检测中的临床意义[J].实用心脑肺血管病杂志,2012,20(5):881-882.
  [5]王岩青.凝固酶阴性葡萄球菌胞外黏质物检测及临床意义的探讨[J].中国社区医师:医学专业,2011,13(35):224-225.
  [6]王岩青.溶血影响的机制凝固酶阴性葡萄球菌胞外黏质物检测及临床意义的探讨[J].中国社区医师:医学专业,2011, 13(35):224-225.
  [7]黄红宇,周帑.金黄色葡萄球菌5年耐药性监测结果分析[J]. 中国全科医学,2011,14(12):1302-1304.
  [8]张静华,袁应华,刘妍,等.2种表型试验检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的评估及基因分析[J].检验医学,2015, 30(12):1238-1242.
  

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